دستورالعمل کار با دستگاه

دستگاهBUCHI K-370

تهیه کننده

دکتر فاطمه قنبری کارشناس آزمایشگاه مرکزی استان فارس

بسمه تعالی

BUCHI K-370

دستگاهی که در اختیار شما همکاران عزیز قرار دارد وسیله ای پیشرفته است که میتواند کار شما را در تعیین درصد پروتئین وارزش غذایی خوراک دام وطیور وغیره تسهیل وباعث صرفه جویی در زمان گردد.  پیش از این تعیین درصد پروتئین با دستگاههای کلدال دستی انجام میگرفت که علاوه بر خطرات زیاد ناشی از شدت واکنش ها وگرمای فوق العاده تولید شده به خاطر بسته نبودن کامل سیستم, احتمال خطا در نتایج نیز وجود داشت که با استفاده ازاین دستگاه علاوه بر حفاظت از پرسنل  اطمینان شما به پاسخهای ارائه شده نیز بیشتر می باشد .

این دستگاه شامل سه بخش است:

                                                                                                         DIGESTION UNIT

AUTOKJELDAL UNIT

SCRUBBER

واحد هضم این دستگاه دارای 20 خانه است درقسمت بالا درپوشها بعد بخش نمونه ها وکف المنت و در بخش پایین کنترل پنل است. برای ریختن نمونه ها با استفاده از دستگیره  بغل دستگاه سینی حاوی تیوبها رابر            می داریم و بالای دستگاه سوار می کنیم. جدا کردن درپوش توسط دستگیره سمت راست انجام می شود. بخش درپوش 4ردیف 5تایی دارد که هرکدام ضد اسید برای جلوگیری از نشت گاز است. درپوش های بالایی در انتها به یک لوله ارتباط دارند که توسط یک شلنگ سیاه ضد اسید به دستگاه اسکروبرمتصل میشود. بعد از قرار دادن تیوبها درپوش را فیکس می کنیم و به آرامی درپوش را به طرف پایین فشار می دهیم تا پایه های مشکی به پایین برسد سپس با استفاده از دو دستگیره سیستم را پایین آورده درhot plat  قرار می دهیم سپس درپوش را به طور کامل با فشردن بخش فلزی فیکس می کنیم.

دستگاه با کلید سبز رنگ روشن می شود سپس چند دقیقه صبر می کنیم تاعبارت ها ثابت شود.پارامترهای دستگاه شامل یک کلید تنظیم دما,زمان,اینتر,استارت واستاپ است.

دما از 30-420درجه سانتی گراد قابل تنظیم است. برای این منظوردکمه temp  را یکبار فشرده  که عدد مربوط به دما بصورت چشمک زن ظاهر میشود وبا دکمه هایup و downعدد را تنظیم میکنیم که بین 350-400 تعریف می شود با زدن دکمه اینتر عدد در حافظه قرار می گیرد.بعد زمان راتنظیم میکنیم که تجربه دستگاههای قدیمی 60-120 دقیقه را به ما توصیه میکند که عدد مورد نظر را انتخاب واینتر می کنیم سپس با فشردن دکمه استارت عبارت preheat 27 ظاهر می شود که این دما موجب میشود شوک حرارتی به دستگاه وارد نشود بعد کم کم دما افزایش می یابد که در مقابل set تنظیمات خودمان ودر مقابل actual تنظیمات خود دستگاه دیده می شود.زمان preheat از زمان اصلی کم نمی شود.چراغ heat روشن ودستگاه گرم می شود.اگر به هر دلیلی بخواهیم دستگاه متوقف شود کلید stop را می زنیم که عبارت abort   ظاهر می شود که سوال توقف روند کار است که اگر بخواهیم ادامه بدهیم کلید start واگر بخواهیم کار متوقف شود کلید stop   رامجددا فشار می دهیم. بعد از preheat دستگاه نمونه ها را به حرارت رسانده  ومدت زمان لازم در دمای مورد نظر خواهد ماند وبعد سیستم stand by می شود که می توان دستگاه را خاموش  وهولدر را بالا ببریم   تا روند سرد شدن تسریع گردد.لوله های هضم قبل از خروج  باید کاملا سرد شوند وتا قبل از آن دستگاه اسکروبر را خاموش نمی کنیم ودر پوش ها را نیز برنمی داریم.

SCRUBBER

خنثی وفیلتر کردن گازهای دستگاه هضم توسط این بخش انجام می شود که با یک شلنگ سیاهرنگ به سیستم هضم متصل است یک کندانسور پشت دستگاه داریم که مرحله اول فیلتر کردن را انجام می دهد وگاز ها با عمل میعان در مخزن زیرین آن جمع می گردد بقیه گازها توسط لوله سفید رنگ به مخزن سود وارد می شود که یک مرحله دیگر عمل خنثی شدن روی آن انجام می شود و اضافه آن در امتداد مسیر به عقب رفته ودر شیشه پشتی فیلتر و در نهایت هوای سالم از دستگاه خارج می گردد.محلولی که در مخزن سود استفاده می شود سود 10-20%  همراه با معرف بروموتیمول بلو که با اتانول مخلوط است  می باشد که با تغییر رنگ زمان تعویض مشخص می شود واگر از معرف استفاده نکردیم با   کدر شدن سود می بایست برای تعویض آن اقدام کرد برای این منظور شلنگ ضد اسیدرا با پیچ سیاه باز می کنیم بخش عقب باز وظرف شیشه ای خارج میشود .درپوش بالایی وقاب محافظ را بر می داریم ومخزن سود جدا می شود که از طریق منفذ بالایی تخلیه وسود جدید را وارد می کنیم وبعد بقیه بخش ها را جا می زنیم اول قاب محافظ را قرار می دهیم بعد در پوش بالایی را سوار می کنیم تا کاملا فیت شود شلنگ ارتباط کندانسور ومخزن راکاملا می بندیم لوله شیشهای بالایی را جا می زنیم وشلنگ مربوطه را هم وصل میکنیم.

برای اطمینان از عملکرد آن یکبار دستگاه را روشن وخاموش می کنیم که اگر حالت قل قل کردن نداشته باشد یعنی مکش نداریم که میتواند ناشی از خوب چفت نشدن یکی از اتصالات باشد.در حین کار باید حتما شیر آب کندانسور باز باشد.

نظافت کندانسور

ابتدا مخزن زیرین آنرا با پیچاندن جدا می کنیم شیر آب را می بندیم اتصالات بخش هضم را که مشکی است جدا می کنیم اتصال مخزن هم جدا می شود وکندانسور را به صورت کشویی بطرف عقب می کشیم واتصالاتش جدا وشسته می شود وقتی که پس از نظافت بخواهیم آنرا جا بزنیم کندانسور را در شیارهایش جا می زنیم بطری را به کندانسور وصل تاخوب متصل ومکش انجام شود.

v    پس از هر بار استفاده از دستگاه هضم شلنگ سیاهرنگ را باز وآنرا داخل یک ظرف آب مقطر قرار می دهیم تا بست هایش تمیز شود وعمر مفید دستگاه بیشتر شود.

AUTOKJELDAHL UNIT

در این بخش عمل تقطیر وتیتراسیون بر روی نمونه های هضم شده انجام ونتایج بصورت اعداد بر صفحه نمایش داده می شود.این دستگاه 4 تانک دارد

1-سود(8نرمال)

2-آب(اضافه کردن آب مقطر به نمونه)

3-آب(تامین آب مقطر برای بخار دستگاه)

4-اسید بوریک (4درصد+معرف توشیرو)

برای کار با دستگاه لوله هضم را با گیره نگه می داریم دستگیره را بالا داده وبر می داریم.تیوب های 300 سی سی و500 سی سی برای این دستگاه قابل استفاده است که تیوب 300 مندرجاتش در سمت راست وتیوب 500 در سمت چپ است .تازمانی که درپوش محافظ در جای خودقرار نگیرد دستگاه شروع به کار نخواهد کرد. آب ,سود واسید بوریک در محل خود ریخته وبخار به داخل کندانسور هدایت وداخل ظرف کناری جمع می شود بعد از پایان تقطیر دستگاه شروع به تیتر می کند.

دستورالعمل کار با دستگاه

ابتدا دستگاه را روشن وشیر آب کندانسور را باز می کنیم چنددقیقه بعد از روشن شدن اجازه می دهیم تا دستگاه گرم وآب را به بخار تبدیل کند.

اولین منویی که بر روی دستگاه ظاهر می شود Configurator است از  این منو Group را انتخاب می کنیم که در آن اطلاعات مربوط به نمونه ها را وارد می کنیم که اسم نمونه,وزن آن ,نوع نمونه و غیره است

روشی را برای تقطیر مشخص می کنیم که شامل پارا مترهای عمل تقطیر است که میزان سود وآب مقطر اضافه شده وزمان تقطیر وقدرت بخار را شامل می شود.

 روشی را هم برای تیتر کردن معرفی می کنیم که یا Back titration ویا Boric acid titration است اینکه  PHنهایی چقدر باشد  حجم اسید بوریک وفاکتور پروتئین را هم مشخص می کنیم واینکه چه اسیدی برای تیترا سیون استفاده می شود.

دو روش را برای تقطیر وتیتراسیون تعریف کردیم که هر دو در یک منوی Methodتعریف می شود.

برای تعریف یک متد یک روش تقطیر وتیتراسیون را تعریف می کنیم در نهایت باید گروهی که نمونه ها را در آن تعریف کرده ایم Loud کنیم وبگوییم این گروه نمونه ها را با این روش که شامل تقطیر وتیتراسیون است انجام بده.

این دستگاه سه پنجره اصلی دارد

1- Configurator

2-Operator

3-K370 status

برای تغییر این پنجره ها از کلیدMode استفاده می کنیم هر کدام ازاین پنجره ها چند زیر مجموعه دارد ؛که در پنجره Configurator روش هایی را برای استخراج وتیتر کردن پروتئین تعریف می کنیم.

نحوه تعریف برنامه تقطیر وتیتراسیون:

با استفاده ازکلید های upوdownمی توانیم بین 6 گزینه جابجا شویم وعبارتMethod را انتخاب کنیم وبا اینتر وارد شویم که1-6 شماره داریم اولین آنها Determination method  متد اندازه گیری است که محلی است که شامل روش تقطیر وتیتراسیون می شود متدهای 2و3و4 زیر مجموعه Determination method   است .

دوم Digestion method است که این دستگاه ,دستگاه هضم را هم کنترل می کند که ما این کار را نمی کنیم.

سوم  Distillation method است که روش تقطیر را تعریف می کند.

چهارم Titration methodاست که روش تیتر کردن را تعریف می کند.

پنجم Priming method  است که همزمان با تقطیر تیتراسیون را هم انجام می دهد.

ششم Cleaninig method  است که در پایان کار نظافت دستگاه را انجام می دهد.

Distillation method

دو متد استاندارد داریم که از آنها استفاده نمی کنیم. برای تعریف یک روش تقطیرNew را کلیک می کنیم. با کلید Tab یبن گزینه ها جابحا می شویم

Method name     :       test 1

Water                  :       60 ml

NAOH                 :       60 ml

Reaction time     :       5

Distillation time :       240 M

Stream power    :       100%

کلید page که 3 بخش بالایی دارد را یکی یکی باز می کنیم وبا همان بر می گردیم که اصل کار روی basic data  است بعد اطلاعات را ذخیره می کنیم. با فشردنclose از این منو خارج می شویم وبا دکمه هایup وdown روی test 1میآییم  و پارامترها را می بینیم  ومی توان در صورت لزوم پارامتر ها را تغییرداد ویا  ذخیره کرد.

Titration method

Basic                 :             data

Method name   :             test 1

Type     O Buric acid              O Back titration

                                                          غیر فعال                               Reciving   sol     :        

Titration solution :        H2SO4   0/2 M

Volum reciving sol:       60ml

Min titration time :        5s

Max titration volum:      100ml

با دکمه page به سر فصل دوم می رویم که mode  است که استاندارد را انتخاب می کنیم که تقطیر تمام شود بعد تیتراسیون انجام شود

Titration mode        :         standard

Start titr                   :

Max dist. Time        :

Type                         :            Endpoint

PH                            :             4/65

Algorithm                :              1

با کلیدpage پارامترهای دیگر را هم چک می کنیم.

سپس وارد    Method میشویم که باید تیتراسیون وتقطیر را در قالب یک سرفصل بزرگتر بنامDetermination method تعریف کنیم که آنرا انتخاب  و بعد در متدها , متد new وبعدtest 1  را می نویسیم

                                                                                                            Determination method

Name                       :              test 1

Digestion method   :               none

Disttilation method:              test 1

Titration method   :              test 1

Aspiration      O receiving soln

                        O sample

بعدpage را می زنیم گزینه mode می آید که

Stirrer speed distillation  5

سرعت چرخش همزن در زمان تقطیر

Srirrer speed titration      7

سرعت چرخش همزن در زمان تیتراسیون

بعد همه اطلاعات را ذخیره می کنیم.سپس به منوی Configurator بر می گردیم  وGroupرا انتخاب می کنیم واینتر می کنیم ,هر قفسه شامل یک فولدر است که باید نام خاصی به آن بدهیم که از تاریخ استفاده می کنیم .گزینه  newرا انتخاب ویک گروه جدید می سازیم بعد آنرا ذخیره میکنیم با دکمه close خارج شده ونام فولدر خود را می بینیم که با اینتر آنرا باز می کنیم ونمونه ها را تعریف می کنیم ابتدا  کلیدnew را می زنیم

                                                                                          1 Name                       :            

                                                                                          1             Weight                     :

Type                         :           Sampel

Protein factor          :            6/25

Methode                   :            test 1

برای رفتن به نمونه دوم کلیدnext را فشار می دهیم ودر پنجره بعد با انتخاب  yes اطلاعات را ذخیره می کنیم؛ اگر بخواهیم به نمونه قبل برگردیم از   previousاستفاده می کنیم . بعداز وارد کردن تمام نمونه ها دکمهclose را زده واطلاعات وارد شده را در یک جدول می بینیم.

برای اجرای عملیات به متد Configuratorبر میگردیم وبا فشار دادن دکمهmode وارد بخشoprator می شویم

Determination---enter---group

گروهی که ساخته ایم برای نمونه ها ظاهر می شود بعد اینتر می کنیم وبه ترتیب تمام نمونه ها را لیست می کند وپایین دکمهRun را داریم که باید نمونه ها را جایگزین ودکمهrun را می زنیم. Determination بر روی صفحه ظاهر می شودوتقطیر وتیترا سیون را انجام می دهد بعد با دکمه pageنتایج را می توانیم ببینیم وبا دکمه  modeبه صفحه اصلی بر میگردیم . اگر میزان سود یا آب ریخته شده کم بود بصورت  autorun با دکمه های H2O یاNAOH میتوان به آن اضافه کرد . بین انجام هر دو نمونه 1 دقیقه به دستگاه استراحت می دهیم.

در صورتی که نتایج را یادداشت نکرده باشیم برای دیدن نتایج

Mode---Configuration---Data manager---result---group---name

ونتایج را مشاهده می کنیم